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3次元培養法を用いた栄養膜幹細胞からの胎盤様構造体構築
小川英彦、上田真弓、河野友宏
第55回 日本卵子学会 2014.05
Event date： 2014.05
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：神戸国際会議場
本研究では、3次元培養法を用いてTS細胞から胎盤様構造体構築を目指して、細胞凝集塊を構築しその特徴を明らかにすることとした。ハンギングドロップ法および超低接着性96ウェルプレートを用いて70 Cond F4H培養液またはTS培養液でTS細胞を5日間培養し、細胞凝集塊を形成させた。形成された細胞凝集塊を構成する細胞を把握するために、未分化細胞特異的遺伝子Cdx2、栄養膜巨細胞特異的発現遺伝子PL-1、海綿状栄養膜細胞特異的遺伝子Tpbpa、迷路層栄養膜細胞特異的遺伝子Gcm1の発現をRT-PCR法により調べた。さらに細胞凝集塊から凍結切片を作製し、HE染色後その構造を観察した。細胞凝集塊の形成率は、培養液により違いは認められなかったが、ハンギングドロップ法で約40％、超低接着性96ウェルプレートでは100%であった。そこで、以降の実験では細胞凝集塊の形成は超低接着性96ウェルプレートで行った。超低接着性96ウェルプレートで形成させた細胞凝集塊における遺伝子発現解析を行った結果、70 Cond F4H培養液またはTS培養液で形成させた細胞凝集塊のどちらもPL-1、Tpbpa、Cdx2の発現が認められた。また、Gcm1の発現もわずかに認められた。以上の結果から、形成された細胞凝集塊には、栄養膜巨細胞、海綿状栄養膜細胞、迷路層栄養膜細胞へ分化した細胞が含まれていると考えられた。さらに、Cdx2の発現が認められたことから、形成された細胞凝集塊には、未分化な細胞も存在する可能性が示唆された。
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マウス雄核発生胚由来栄養膜幹細胞におけるCdx2の発現はFGF4に依存しない
森本 洋武、武弓 竜一、小川 英彦、河野 友宏
第106回 日本繁殖生物学会大会 2013.09
Event date： 2013.09
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：東京農工大学
マウス栄養膜幹細胞は、FGF4依存的にCdx2の発現が維持される。しかし、雄核発生胚由来栄養膜幹細胞では、FGF4除去後もCdx2の発現が維持された。その原因を解析した結果、雄核発生胚由来栄養膜幹細胞では、FGF4非依存的に細胞増殖を示す細胞がCdx2を発現していることが明らかとなった。
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Aberrant Expression of Cdx2 in Trophoblast stem Cells Derived from Androgenetic Embryos. International conference
Hidehiko Ogawa, Ryuichi Takyu, Hiromu Morimoto, Tomohiro Kono
SSR 46th Annual Meeting 2013.07
Event date： 2013.07
Language：English Presentation type：Poster presentation
Venue：Montreal, Canada
栄養膜幹細胞は、Fgf4依存的に転写因子Cdx2を発現することが知られている。このFgf4依存的なCdx2の発現には、MEK-ERK経路が関与している。一方、雄核発生胚由来栄養膜幹細胞はFgf4非存在下においてもCdx2の発現が維持された。以上の結果から、雄核発生胚におけるCdx2の発現はFGF4非依存的であり、MEK-ERK経路以外の経路によるものと考えられた。
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マウス雄核発生胚由来栄養膜幹細胞から分化した細胞の特性
武弓 竜一、森本 洋武、小川 英彦、河野 友宏
第105回 日本繁殖生物学会大会 2012.09
Event date： 2012.09
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：筑波大学
雄核発生胚由来栄養膜幹細胞の特性を明らかにする為に、分化能を解析した。その結果、雄核発生胚由来栄養膜幹細胞は分化誘導後、細胞の増殖性が維持されることが明らかとなった。
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マウスにおける新規父方特異的メチル化 DNA 領域の探索
坂下陽彦、小林久人、尾畑やよい、小川英彦、河野友宏
第53回 日本卵子学会 2012.05
Event date： 2012.05
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：千里ライフサイエンスセンター
新規父方特異的メチル化 DNA 領域の探索
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Developmental ability of extraembryonic tissues in uniparental mouse embryos. International conference
Hidehiko Ogawa, Shiori Goto, Shota Moriya, Tomohiro Kono
The 2nd World Congress on Reproductive Biology 2011.10
Event date： 2011.10
Language：English Presentation type：Poster presentation
Venue：Cairns, Queensland, Australia
雌核発生胚ならびに雄核発生胚における胎盤組織の発生能を明らかにする為に、妊娠9.5日目の受胎産物における胎盤組織特異的発現遺伝子の発現を、In situハイブリダイゼーションにより観察した。対象遺伝子は、海綿状栄養膜細胞特異的遺伝子として Tpbpa、栄養膜巨細胞特異的遺伝子としてPl-1, Pl-2, Plf, Plpaとした。栄養膜巨細胞特異的遺伝子を発現する細胞数は、雌核発生胚では減少し、雄核発生胚では増加した。一方、海綿状栄養膜細胞特異的遺伝子を発現する細胞は、雌核発生胚、雄核発生胚ともに認められなかった。以上の結果から、栄養膜巨細胞への分化は雄ゲノムにより促進され、雌ゲノムによって抑制されると考えられらた。
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マウス雌核発生胚の胚盤胞期胚における内部細胞塊および栄養外胚葉における網羅的遺伝子発現解析
小川 英彦、後藤 詩織、岸 靖典、曹 峰、河野 友宏
第104回 日本繁殖学会大会 2011.09
Event date： 2011.09
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：岩手大学
マウス雌核発生胚の致死要因を明らかにする為に、マイクロアレイを用いて内部細胞塊および栄養外胚葉における網羅的遺伝子発現解析を行った。
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核移植による栄養膜幹細胞ゲノムの全能性再獲得能の評価
渡邊紘之、小川英彦、河野友宏
第52回 日本哺乳動物卵子学会 2011.05
Event date： 2011.05
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：国際医療福祉大学
栄養膜幹細胞のリプログラミング能を評価するために、栄養膜幹細胞をドナーとした核移植胚を作製し、発生能を解析した。その結果、ほぼ全ての胚は2細胞期で発生停止し、胚盤胞への発生率は15％以下であった。以上の結果から、栄養膜幹細胞のリプログラミングが不十分であることにより、胚ゲノムの活性化が認められないことが発生停止をもたらしたと考えられた。
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マウス胚盤胞期胚の内部細胞塊と栄養外胚葉における網羅的遺伝子発現解析
小川英彦、後藤詩織、岸 靖典、曹 峰、河野友宏
第52回 日本哺乳動物卵子学会 2011.05
Event date： 2011.05
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：国際医療福祉大学
哺乳動物の胚盤胞期胚は内部細胞塊と栄養外胚葉とからなる。着床後、内部細胞塊は胎子へ、栄養外胚葉は胎膜や胎盤へと分化する。したがって、分化能が異なるこれら2つの細胞における遺伝子発現は、異なっていることが予想される。そこで、本研究では、両細胞の遺伝子発現をマイクロアレイ法を用いて網羅的に解析した。
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雄核発生胚および雌核発生胚における胚体外組織への分化能の解明 International conference
小川英彦・後藤 詩織・森谷 昇太・河野 友宏
日本繁殖生物学会大会 2009.09
Event date： 2009.09
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：近畿大学
第一次栄養膜巨細胞への分化能は雄核発生胚では促進し、雌核発生胚では抑制されることを示した。
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マウス栄養膜巨細胞への分化にFzr1遺伝子が関与する
小川英彦・Dave Natale・Martha Hughes・James Cross・河野友宏
第101回日本繁殖生物学会大会 2008.09
Event date： 2008.09
Language：Japanese Presentation type：Poster presentation
Venue：九州大学
Fzr1遺伝子ノックアウト胚から樹立したTS細胞の細胞特性を明らかにした。
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Establishment of trophoblast stem cells from mouse androgenetic and parthenogenetic embryos. International conference
H. Ogawa, N. Shindo, S. Tanaka, T. Kono
Proceedings of the Annual Conference of the International Embryo Transfer Society 2007.01
Event date： 2007.01
Language：English Presentation type：Poster presentation
Venue：Kyoto, Japan
雄核発生胚および雌核発生胚から樹立したTS細胞の特性
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Expression analysis of imprinted genes in uniparental fetuses. International conference
Ogawa H, Wu Q, Kawahara M, Hiura H, Komiyama J, Obata Y, Kono T.
Genomic Imprinting Workshop 2006 2006.11
Event date： 2006.11
Language：English Presentation type：Poster presentation
Venue：Tokyo, Japan
雄核発生胚および雌核発生胚におけるインプリント遺伝子の発現を解析した結果、いくつかの遺伝子で刷り込みによる発現制御が破綻していることが明らかとなった。
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マウス父性インプリント遺伝子の精子形成過程におけるDNAメチル化修飾時期の特定 International conference
白井求、小見山純一、小川英彦、河野友宏
第99回日本繁殖生物学会大会 2006.09
Event date： 2006.09
Language：Japanese Presentation type：Poster presentation
Venue：名古屋大学
精子形成過程におけるDNAメチル化修飾の獲得時期を明らかにした。
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非コードインプリント遺伝子Gtl2欠損マウスの発生解析
高橋望、岡本晶、小川英彦、尾畑やよい、河野友宏
第99回日本繁殖生物学会大会 2006.09
Event date： 2006.09
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：名古屋大学
Gtl2欠損マウスの発生能を解析した。
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マウス胎仔肝臓の造血機能に及ぼすIgf2およびDlk1遺伝子の影響
呉ケイ、川原学、小川英彦、尾畑やよい、ファーガソンースミス アン、河野友宏
第99回日本繁殖生物学会大会 2006.09
Event date： 2006.09
Language：Japanese Presentation type：Poster presentation
Venue：名古屋大学
マウス胎仔肝臓の造血機能へのIgf2およびGtl2遺伝子の役割について解析した。
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Maturation of porcine oocytes reconstracted with a nucleus from the growing stage oocytes. International conference
Matuzaki T, Yamamoto A, Honda Y, Ogawa H, Kono T.
Society for the Study of Reprodction, 39th annual meeting 2006.07
Event date： 2006.07
Language：English Presentation type：Poster presentation
Venue：Omaha, USA
非成長期卵母細胞をドナーとした核移植胚の成熟能を調べた。
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マウス雄核発生胚由来TS様細胞の樹立とその特性
新藤直明、小川英彦、河野友宏
第106回日本畜産学会大会 2006.03
Event date： 2006.03
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：九州大学
マウス雄核発生胚から樹立したTS様細胞の特性を明らかにした。
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ブタ卵母細胞核移植胚の成熟能の評価 International conference
松崎隆、山本晃夫、本多泰明、小川英彦、河野友宏
第106回日本畜産学会大会 2006.03
Event date： 2006.03
Language：Japanese Presentation type：Oral presentation (general)
Venue：九州大学
仔ブタ由来の非成長期卵母細胞をドナーとした核移植胚における成熟能を調べた。
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マウス単為発生胚由来栄養膜幹細胞様細胞の特性
小川英彦、熊谷拓也、鹿内弥磨、田中智、有馬隆博、河野友宏
第105回日本畜産学会大会 2005.09
Event date： 2005.09
Language：Japanese Presentation type：Poster presentation
Venue：札幌コンベンションセンター
マウス単為発生胚由来TS様細胞の分化誘導後の形態的変化・遺伝子発現変化を明らかにした。