Papers - NOGUCHI Tatsuo
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Cell free mitochondrial DNA in plasma and physical condition of cows Reviewed
NOGUCHI Tatsuo, AIZAWA Takuro, IWATA Hisataka
Nihon Chikusan Gakkaiho 91 ( 3 ) 227 - 232 2020.08
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal) Publisher：Japanese Society of Animal Science
<p>Blood contains cell free DNA (cfDNA), and cell free mitochondrial DNA(cf-mtDNA) is able to be easily detected by real time PCR. The present study investigated the relationship between the amount of cf-mtDNA in plasma and physiological conditions of cows. In addition, relationship between preg-nancy following artificial insemination and concentration of cf-mtDNA in the corresponding plasma. Significantly positive relationship was found between concentration of LDH and cf-mtDNA, and negative relationship was found between concentration of triglyceride and cf-mtDNA. There was no significant difference in the amount of cf-mtDNA between pregnant or non-pregnant cows following artificial insemination.</p>
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NOGUCHI Tatsuo, AIZAWA Takuro, MUNAKATA Yasuhisa, IWATA Hisataka
Journal of Reproduction and Development 66 ( 1 ) 35 - 39 2020
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal) Publisher：The Society for Reproduction and Development
<p> Embryo transfer uses embryos developed <i>in vivo</i> or <i>in vitro</i> for cattle production, however there is a difference in the quality of the embryos obtained by the two methods. This study addresses the differences in gene expression between blastocysts developed <i>in vitro</i> and <i>in vivo</i>. <i>In vivo</i> blastocysts were flushed from the uteri of super-ovulated cows and blastocysts developed <i>in vitro</i> were derived from <i>in vitro</i> matured and fertilized embryos. The same batch of frozen bull sperm was used for insemination and <i>in vitro</i> fertilization. Blastocysts were then subjected to RNA sequencing. Differentially expressed genes upregulated in <i>in vitro</i> blastocysts were annotated to focal adhesion, extracellular matrix (ECM)-receptor interaction, and PI3K-Akt signaling and the genes that were upregulated in <i>in vivo</i> blastocysts were annotated to oxidation-reduction processes, mitochondrion organization, and mitochondrial translation. Although the total cell number of the two types of blastocysts was similar, the mitochondrial quantity (determined by mitochondrial DNA copy numbers and expression levels of TOMM20), and ATP content in the blastocysts were lower in <i>in vivo</i> blastocysts compared with those developed <i>in vitro</i>. In conclusion, RNAseq revealed differential molecular backgrounds between <i>in vitro</i> and <i>in vivo</i> developed blastocysts and mitochondrial number and function are responsible for these differences.</p>
DOI： 10.1262/jrd.2019-100
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Genetic Diversity of <i>BoLA-DRB3</i> in Japanese Brown Cattle Reviewed
NISHIKAKU Kohei, INENAGA Toshiaki, NISHI Akihito, YONEZAWA Takahiro, NOGUCHI Tatsuo, TORII Yasushi, IMAKAWA Kazuhiko, KOBAYASHI Tomoko
Journal of Veterinary Epidemiology 26 ( 2 ) 108 - 115 2022.12
Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal) Publisher：The Japan Society of Veterinary Epidemiology
<p>Enzootic bovine leukosis is the most common neoplastic disease in cattle caused by the bovine leukemia virus (BLV). Previous studies have shown that allele type in the <i>DRB3</i> region of the bovine major histocompatibility complex (bovine leukocyte antigen: <i>BoLA</i> in cattle) is associated with resistance or susceptibility to infectious diseases. The Japanese brown (JBR) cattle have a genetic background of small population size, and thus, may exhibit different susceptibility to diseases compared with other cattle breeds. In the present study, we analyzed the diversity of the <i>BoLA-DRB3</i> gene and attempted to clarify the genetic composition of the Kumamoto and Kochi strains belonging to the JBR.</p><p>Allele typing of the <i>BoLA-DRB3</i> gene of 184 JBR detected 16 and 13 alleles in the Kumamoto and Kochi strains, respectively. The analysis of the observed (<i>H</i>o) and expected (<i>H</i>e) heterozygosity of the JBR based on allele frequencies, as well as <i>F</i>is (using <i>H</i>o and <i>H</i>e), which indicates the inbreeding coefficient within a population, showed each population to have different <i>BoLA-DRB3</i> gene diversities. Consequently, the degree of genetic difference among the populations (<i>F</i>st) was analyzed based on the allele frequencies of the <i>BoLA-DRB3</i> gene. The results showed the JBR populations to be genetically closer to the native Philippine and Myanmar cattle populations than the Japanese black, Japanese Shorthorn, Holstein or Jersey population. Furthermore, the proportions of cattle with at least on allele, which was reported to be associated with low proviral load (PVL) on infection of BLV, were 15.7% (20/127) and 63.1% (37/57) in Kumamoto and Kochi strain, respectively, and showed a significant difference. In the future, the direct evaluation of the <i>BoLA-DRB3</i> gene allele types and PVL in BLV-infected individual cattle is warranted. In addition, the PVL of BLV-infected JBR of the Kumamoto strain is known to be lower than that of other breeds in Japan. Therefore, it is necessary to investigate the possibility of a different mechanism on PVL regulation from allele types.</p><p>The results of <i>BoLA-DRB3</i> gene diversity and allele frequency analysis indicate that the JBR has a different genetic background from the Japanese black and the Shorthorn populations and possesses low PVL-associated alleles. Further studies are needed to analyze the relationship between PVL and <i>BoLA-DRB3</i> gene in JBR to clarify the susceptibility of JBR to BLV.</p>
DOI： 10.2743/jve.26.108
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Predicting of molecules mediating an interaction between bovine embryos and uterine epithelial cells Reviewed
NOGUCHI Tatsuo, HAYASHI Takeshi, INOUE Yuki, HARA Shunsuke, SHIRASUNA Koumei, IWATA Hisataka
Journal of Reproduction and Development 68 ( 5 ) 318 - 323 2022.10
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal) Publisher：The Society for Reproduction and Development
<p> Embryo-maternal reproductive tract interactions are pivotal for successful pregnancy. The present study predicted the molecules modulating embryo-uterine communication by comparing two sets of differentially expressed genes (DEGs): DEGs in uterine epithelial cells (UECs) collected from the uterus with and without blastocysts and DEGs between blastocysts developed <i>in vivo</i> and <i>in vitro</i>. Cows were subjected to super ovulation (SOV), followed by insemination or non-insemination at estrus (SOV + AI and SOV cows). Seven days after estrus, the uterus was flushed to collect UECs, and the presence of blastocysts in the uterus was confirmed. UECs were subjected to RNA-Sequencing (RNA-Seq) to identify DEGs. Publicly available RNA-Seq data of <i>in vivo</i> and <i>in vitro</i> developed bovine blastocysts were used to determine DEGs. Then, using ingenuity pathway analysis, activated- and inhibited-upstream regulators (USRs) for UECs in blastocysts were compared with those for blastocysts developed <i>in vivo</i>. RNA-Seq of UECs revealed that the DEGs were associated with immune response and cell adhesion pathways. The activated and inhibited USRs of UECs derived from SOV+ AI cows overlapped with the activated and inhibited USRs of blastocysts developed <i>in vivo</i>. Overlapping activated USRs include leukemia inhibitory factor, interleukin 6, fibroblast growth factor-2, transforming growth factor beta-1, and epidermal growth factor. In conclusion, the present study predicted the molecules that potentially mediate communication between the developing embryo and the uterus <i>in vivo</i> and prepare the uterus for pregnancy.</p>
DOI： 10.1262/jrd.2022-046
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NISHIKAKU Kohei, NOGUCHI Tatsuo, MURAKAMI Satoshi, TORII Yasushi, KOBAYASHI Tomoko
Journal of Veterinary Medical Science 84 ( 3 ) 350 - 357 2022
Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal) Publisher：JAPANESE SOCIETY OF VETERINARY SCIENCE
<p>Bovine leukemia virus (BLV) is an important pathogen associated with enzootic bovine leukosis. In this study, we performed PCR and sequencing analysis to characterize BLVgp51 sequences from formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) specimens made from 1974 to 2000 and successfully obtained BLV proviral genome sequences from 94% of the analyzed samples. Furthermore, from these samples, we reconstructed eight full-length and nearly full-length BLVgp51 sequences. These sequences were classified as BLV genotype 1, implying that genotype1 has already been circulating in Japan since the 1970s. In our results, the proviral DNA was detected in the 1970s, 1980s, and 1990s in the same manner, indicating that the detection of BLV proviral genome depends on storage conditions rather than storage period. The sequences obtained in this study provide direct insights into BLV sequences before 2000, which serves as a good calibrator for inferring ancient BLV diversity.</p>
DOI： 10.1292/jvms.21-0570
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高受胎を得るためのウシ胚移植技術の開発
野口 龍生
2020.10
Language：Japanese Publishing type：Doctoral thesis
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Xanthan gum and locust bean gum substrate improves bovine embryo development Reviewed
Shunsuke Hara, Sogo Aoki, Miki Nagata, Koumei Shirasuna, Tatsuo Noguchi, Hisataka Iwata
Reproduction in Domestic Animals 2020
Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
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Improvement of fertility in repeat breeder dairy cattle by embryo transfer following artificial insemination: possibility of interferon tau replenishment effect Reviewed
Hikari Yaginuma, Natsumi Funeshima, Nao Tanikawa, Motoharu Miyamura, Hideki Tsuchiya, Tatsuo Noguchi, Hisataka Iwata, Takehito Kuwayama, Koumei Shirasuna, Seizo Hamano
Journal of Reproduction and Development 65 223 - 229 2019
Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
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The transfer of parthenogenetic embryos following artificial insemination in cows can enhance pregnancy recognition via the secretion of interferon tau Reviewed
Natsumi Funeshima, Tatsuo Noguchi, Yuri Onizawa, Hikari Yaginuma, Motoharu Miyamura, Hideki Tsuchiya, Hisataka Iwata, Takehito Kuwayama, Seizo Hamano, Koumei Shirasuna
Journal of Reproduction and Development 65 443 - 450 2019
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
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血液中のDNAを用いたウシ胎子の性判別 Reviewed
野口龍生,相澤拓朗,岩田尚孝
日本胚移植学雑誌 41 19 - 23 2019
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
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Modification of mitochondrial function, cytoplasmic lipid content and cryosensitivity of bovine embryos by resveratrol Reviewed
Abe T, Kawahara-Miki R, Hara T, Noguchi T, Hayashi T, Shirasuna K, Kuwayama T, Iwata H
Journal of Reproduction and Development 63 455 - 461 2017
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
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黒毛和種子牛に発症した遺伝性内水頭症の染色体領域の解明 Reviewed
鈴木暁之、佐藤洋一、吉川恵郷、野口龍生、塩谷康生、竹之内直樹、杉本喜憲、渡邊敏夫
日本獣医師会雑誌 60 ( 3 ) 196 - 200 2007.03
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
特定系統の黒毛和種種雄牛を共通の父とする内水頭症が多発し、これらを分娩した母牛と父牛を用い胚移植技術を活用し、再現試験を行った。また、これら全きょうだいおよび過去に発生した半きょうだい材料を用い、DNA連鎖解析を行い、3番染色体のセントロメア近傍にホモ化した共通領域をみいだし、マーカーMB101とDIK069を用いることで診断が可能となった。また、本症の遺伝様式は、単一常染色体劣勢遺伝様式と判定された。「胚移植による全きょうだい家系の作出および発症牛の病理学的検査を担当」総ページ数229
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日本短角種への胚移植による黒毛和種計画生産支援
野口龍生、坂田健一
平成１６年度岩手県家畜衛生年報 34 - 35 2005.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
放牧飼養体系での日本短角種に胚移植技術を応用し、販売価格の高い黒毛和種の計画的生産を試みた。その結果、入牧前にCIDR、エストラジオール製剤、PGF2α類縁体およびGnRH製剤による排卵同期化と胚移植2日前のhCG投与で高い受胎率が得られることが判明した。また、胚移植後牧牛牧区に放牧することで、胚移植による不受胎牛も全て早期に妊娠することが可能であり、農家の経済的負担も少なくすることが可能であった。総ページ数114
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肉用牛増頭に向けた「カシオペアETプロジェクト事業」について
杉澤好幸、佐藤学、藤田茂、杉澤康身、漆田高夫、小川音々、野口龍生、坂田健一
平成１６年度岩手県家畜衛生年報 85 - 87 2005.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
日本短角種に黒毛和種受精卵を移植した結果、受胎率は32％であった。このうち同期化処理を行った牛の受胎率は57％であった。この取り組みによって日本短角種育成保留経費を子牛販売で確保できた。また、地域における黒毛和種素牛の保留・改良が推進されることにより、農家所得の向上や地域活性化につながることが示唆され、牧野の有効活用が成された。総ページ数114
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優良種雄牛造成に向けた体細胞クローン牛生産技術の検討 Reviewed
児玉英樹、野口龍生、鈴木暁之、福成和博、吉川恵郷
岩手県農業研究センター研究報告（要報) ( 5 ) 81 - 88 2005.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
体細胞クローン牛生産のため再構築胚の発生培地の検討と子牛の生産性を確認すると共に再構築胚の染色体数的異常について検討を行った。その結果、胚盤胞発生率では、血清添加共培養区が無血清非共培養区より有意に高い値となったが、受胎率、流産率に差は認められなかった。クローン牛の在胎日数はAIおよびET産子と比べ延長し、生時体重は重かった。また、再構築胚のほとんどで染色体数的異常が認められ、モザイク様を呈した。総ページ数99
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黒毛和種去勢牛における尿道結石症の陰嚢前方切開による外科的治療法
野口龍生、児玉英樹、菊池雄、小田中誠彰、鈴木暁之、安田潤平、鈴木賢、吉川恵郷
平成１４年度岩手県家畜衛生年報 99 - 102 2003.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
黒毛和種去勢牛における尿道結石症の治療方法として、あまり行われていない陰嚢前方を切開することにより閉塞部位へのアプローチおよび栓塞結石の除去方法について検討した結果、栓塞部位へのアプローチの簡便さ、栓塞様式により結石除去には3種の方法が適用され、それぞれ術後は、良好な経過をたどり、ほとんどの症例で肥育期間を満了できた。総ページ数122
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日本短角種繁殖経営における黒毛和種胚移植の導入効果
小梨茂、菊池正、野口龍生、中森忠義、大池裕治
岩手県農業研究センター研究報告（要報) ( 3 ) 109 - 114 2003.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
日本短角種にOvsynchを活用した胚移植と自然交配の組み合わせは実用性が高と判断され、経営収支モデルによる試算の結果、岩手県有種有牛を父とする胚を移植する前提であれば、受胎率が30％以上で経営的なメリットがあることが明らかになった。さらに、受胎率40％の胚移植技術水準であれば、胚移植経費が8万円（胚代含み）以下であれば、県有種有牛以外を父とする胚を移植する場合でも経営的なメリットが期待できる。総ページ数128
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過剰排卵処理法と経腟採卵法の組み合わせによる胚生産の検討
児玉英樹、千葉伸、野口龍生、大和貢、吉川恵郷
岩手県農業研究センター研究報告（要報) ( 3 ) 115 - 120 2003.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
発情後最初の卵胞波でのOPU-IVFは、FSH前処置の有無にかかわらず1～2個／頭の体外胚生産が可能であった。また、SOV-AI後1日目にOPUを実施した結果、SOV成績における正常胚率が向上する傾向を認めた。さらに、OPU卵子は、1時間以内にIVD101内に移し、37℃に保温することで3時間の保存が可能であり、また、10%FCS+HanksTCM199培地内では、野外での卵子輸送に応用可能であった。総ページ数128
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体細胞クローンウシを利用した黒毛和種種雄牛造成の可能性-期間短縮と経済性の検討-
野口龍生、児玉英樹、鈴木暁之、西田清、吉川恵郷
国際シンポジウム クローン家畜とその安全性 ポスター成果選 43 - 47 2003.03
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
平成14年現在の岩手県での体細胞クローン研究について、まとめた内容であり、主に体細胞クローンウシを活用した種有牛造成について、その期間とコストについて述べたものであり、体細胞クローンウシを産肉検定材料牛として活用した場合、種有牛造成期間は約1.5年短縮でき、検定コストは約5割削減できる見込みである。総ページ数66
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日本短角種におけるウシ筋肉肥大（Double muscling）原因遺伝子の同定とその産肉性 Reviewed
鈴木暁之、太田原健二、野口龍生、杉本善憲、田中修一、小松繁樹、吉川恵郷
東北畜産学会報 52 ( 1 ) 11 - 17 2002.01
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
日本短角種で発生の認められているウシ筋肉肥大（DM）について、その原因遺伝子が既報のエクソン3に存在するnt821(del11)の欠失のみの変異であることが確認したため、この欠損領域を簡易に検出できる診断方法を確立した。この方法で判定した結果、247頭の種有牛のうち30頭がヘテロで保因していることが判明した。産肉調査の結果、DM牛3頭の格付成績は全頭A-1であった。
総ページ数37 -
The timing of fusion and chemical activation in nuclear transfer affects developmental potential of bovine embryos
S. Akagi, S. Takahashi, M. Yokota, T. Noguchi, A. Taniyama, D. Fuchimoto, Y. Izaike
Theriogenology Vol.5 No.1 252 2001.01
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
核移植技術における細胞融合と薬品による複合活性化のタイミングについて検討した結果、レシピエント卵子の成熟培養後、21時間後に電気刺激による細胞融合を行い、その後3時間後にカルシウムイオのフォアとシクロヘキシミドによる活性化を行った区が、その他の24時間後および27時間後細胞融合その後0～6時間後活性化処理を行った区より胚盤胞発生率が有意に高くなった。総ページ数549
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Development of embryos using bovine cumulus cells for nuclear transfer.
S. Akagi、S.Takahashi、T.Noguchi、Hasegawa、M.Shimizu、M.Hosoe,、Y.Izaike
Theriogenology Voｌ.53 No.1 p208 2000.12
Authorship：Lead author Language：English Publishing type：Research paper (scientific journal)
卵丘細胞をドナー細胞として核移植に用いる場合の培養条件を検討した結果、細胞周期のG0/G1期にある細胞率は、体外培養を行わない場合（A区）89.7%、COCの成熟培養後（B区）89.5%、細胞の3日間の体外培養後（C区）76.0%および体外培養で5日間の血清飢餓培養を行った細胞（D区）90.6%であった。これらの細胞をドナーとした場合A区では、融合率、分割率、発生率および胚盤胞の細胞数で、D区との間に有意な差を生じた。総ページ数535
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日本短角種におけるウシ筋肉肥大（Double-muscling）原因遺伝子の変異の同定
鈴木暁之、野口龍生、千葉伸、田中修一
東北農業研究 ( 53 ) 109 - 110 2000.12
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
日本短角種で発生の認められているウシ筋肉肥大（DM）について、その原因遺伝子が既報のエクソン3に存在するnt821(del11)の欠失のみの変異であることが確認できた。また、原因遺伝子の一部が欠失していれば176bp、正常であれば187bpの断片長になるようにPCRプライマーを組み合わせ電気泳動により判定可能とした。この方法で判定した結果、247頭の種有牛のうち30頭でヘテロ型を示し、保因牛であることが判明した。総ページ数282
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乳質改善のためのスクリーニング検査体制整備
野口龍生、菊地正人
平成８年度岩手県家畜衛生年報 39 - 41 1997.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
乳質改善を、効率的に行うため、乳汁中細菌のスクリーニング検査を各農業協同組合畜産担当者に一任した。このことにより検査から指導までの対応が迅速になった。また、農協担当者が細菌検査を行うことにより、各管内の入室の実態を把握し、さらに培地に発育したコロニーを自らの目で確認することで、感心と意欲が向上した。また、培地を農家に見せることにより、乳質に対する理解が深まり、衛生的搾乳の意識が向上した。総ページ数138
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産後起立不能症が多発した酪農家の発生防止指導
野口龍生、菊地正人
平成７年度岩手県家畜衛生年報 48 - 50 1996.04
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
産後起立不能症が多発した酪農家の発生は、長期に亘る低栄養が原因であると思われ、養分充足率をDCP、TDN共に100％以上となるように指導した結果、BCSが上がり、血中総コレステロール値も正常範囲内となり、その後の発症を認めなくなった。このことによる酪農家の収益を計算すると、搾乳牛1頭当たり1日55.4円の増収が見込まれた。総ページ数146
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岩泉町における牛の肝蛭寄生状況
野口龍生、長内幸一
平成5年度岩手県家畜衛生年報 47 - 50 1994.12
Authorship：Lead author Language：Japanese Publishing type：Research paper (scientific journal)
岩泉町では乳用牛においても高率で肝蛭の寄生が確認された。また、ヒメモノアラガイの生息が確認され、調査対象牛の全てで稲藁の給与を受けており、さらに、未熟な堆肥を自家水田に施肥している農家で中卵検出率が高かった。乳用牛で駆虫薬投与群が非投与群より中卵検出率が高率であったが、未投与群では完熟堆肥を施肥している農家が高いためと考えられた。総ページ数155